薄背涡虫再生与胚胎发育过程中Myomodulin相关基因的克隆与表达研究

【摘要】涡虫隶属于扁形动物门涡虫纲，是头部集中化的一种最低等动物，中枢神经系统（centralizednervoussystem,CNS）由一对脑神经节和两条纵贯虫体全长的腹神经索（ventralnervecord,VNC）组成，脑神经节表面有鞘膜包裹，向前、后及两侧共发出9对神经纤维束，中间以横神经相连成神经网络，遍布全身。由于其具有极强的再生能力，被认为是研究再生机制的理想材料，同时涡虫有性生殖过程也较为常见且容易观察，因此也被认为是进行发育生物学研究的重要材料。本文通过对薄背涡虫（Notoplanahumilis）cDNA文库克隆，测序比对发现一克隆为Myomodulin相关基因，对其构建进化树发现：薄背涡虫与同为海产种类的大口涡虫（Macrostomumlignano）同源性最高，其次是地中海圆头涡虫（Schmidteamediterranea），而与其它软体动物门种类同源性偏远。通过应用原位杂交组织化学技术(insituhybridizationhistochemistry,ISHH)对薄背涡虫Myomodulin相关基因在其成体中表达状况进行研究，发现Myomodulin主要分布于脑神经节的前背侧细胞群、吻端细胞群、前腹侧细胞群、腹外侧细胞群及神经干走向、雌性生殖孔、咽部等处，这与Myomodulin在某些动物体中所具有的参与动物体摄食、生殖、调节肌肉收缩等功能相一致。通过对薄背涡虫再生过程中Myomodulin进行组织原位杂交研究，结果显示：再生过程中，Myomodulin在脑神经节中的表达主要集中在前腹部细胞群等处，阳性细胞数量整体呈现先减少后增多的趋势，后腹部等细胞群再生前期基本没有检测到阳性细胞存在，一直到再生11天时开始检测到明显杂交信号，此时伤口已基本愈合。在腹神经索等神经干及神经细支处的表达从再生1天时开始明显呈现增强的态势，后虽略有变化，但在伤口未愈合期间表达含量一直较高，这可能说明Myomodulin在涡虫体内具有肌肉调节的作用。再生过程中，周围组织中Myomodulin表达也有增多，同时这是否也有与来自脑神经节等处Myomodulin的迁移有关仍需进一步的研究。同时通过应用原位杂交技术对薄背涡虫Myomodulin相关基因在胚胎发育过程中的表达进行了研究，结果显示：在整个胚胎发育早期过程中并未检测到有阳性细胞的存在。由此，Myomodulin与薄背涡虫胚胎早期发育过程可能并无关联，即Myomodulin可能并不参与薄背涡虫胚胎发育过程。
【作者】胡国栋；
【导师】王晓安；
【作者基本信息】鲁东大学，动物学，2014，硕士
【关键词】Myomodulin；薄背涡虫；再生；胚胎发育；原位杂交组织化学；

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